技術(shù)原理
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats）是最新出現(xiàn)的一種由sgRNA指導(dǎo)Cas核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)。在這一系統(tǒng)中，sgRNA引導(dǎo)序列靶定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA達(dá)到對(duì)基因組DNA 進(jìn)行修飾的目的。CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠?qū)π∈蠡蚪M特定基因位點(diǎn)進(jìn)行精確編輯，目前瑞思元已經(jīng)成功將此技術(shù)應(yīng)用于小鼠基因敲除/敲入模型制備，以及條件性敲除（Loxp系統(tǒng)）模型制備。
目前瑞思元采取優(yōu)化過(guò)的野生型Cas9和雙切口Cas9n（Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn）。采用優(yōu)化過(guò)的雙切口Cas9n(OCASn)可以將脫靶效應(yīng)降到最低。
條件性基因敲除小鼠
應(yīng)用sgRNA-Cas9和donor的方法將loxP敲入到目的基因兩側(cè)，依賴于Cre酶進(jìn)行條件敲除。
運(yùn)用
研究完全性敲除后致死性目的基因的生理或病理功能；
研究目的基因在特定組織或細(xì)胞中的功能；
研究目的基因在特定時(shí)期或特定階段發(fā)揮的作用；
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
研發(fā)周期短（4-6個(gè)月），同源重組效率高；
打破對(duì)小鼠遺傳品系的限制，可以實(shí)現(xiàn)不同遺傳背景或在已有基因修飾小鼠模型基礎(chǔ)上進(jìn)行基因編輯；
制備流程
歡迎您的咨詢與訂購(gòu)
郵件：risemice@sina.com
電話：13929831415